•产前诊断

•癌症诊断

•出生缺陷的分子细胞遗传学和精神发育迟滞

•染色体异常

•临床遗传学

•神经科学

•生殖医学

•毒理学

•微生物生态学

•进化生物学

•比较基因组学

•细胞基因组学

•区分良性和恶性肿瘤

这个市场的多数是试剂包括FDA批准测试,伴随诊断,研究仅使用探测器,定制试剂探针和支持和供应。有必要进行杂交执行这些劳动密集型的测试设备。理解需要杂交过程设备要求必须清晰地定义。

必要的设备如下:

——酸度计

——天平

——搅拌盘

——微离心机

——冰箱

——冷冻

组织准备要求:

——切片机

——水浴

——烤箱

执行FISH过程将需要下列设备和材料除了试剂:

——幻灯片干燥机

——水浴

——杂交炉

——Coplin罐子

——盖玻片

——染色皿

——橡胶胶水(可选:取决于设备使用)

——荧光显微镜DAPI过滤器(蓝色),FITC过滤器(绿色),德州红色过滤器摄影的能力

FISH的过程——简化

样品准备——depariffinization、脱水、空气干燥,预处理(95 C @ 30分钟,Coplin Jar),蛋白酶治疗(37°C 10 - 20分钟,Coplin Jar),脱水,空气干燥,马克,适用FISH类探测器,

用水泥覆盖玻璃

变性 - 5分钟@ 75°C（45 - 50℃，中期扩展+额外的步骤，以变性探针）杂交 - 37℃，16小时 - 72小时

贴标过程

直接标记 - 标签结合到探针和它是较不敏感的

间接标记 - 检测之前附加步骤，用抗体，结果放大单检测探头

存储 - 4 - 8°C长达两个月的时间，在黑暗区域 - 感光

关键的流程步骤

在FISH的过程分为两个步骤需要的设备用于加热的幻灯片;所述变性步骤和杂交。这些步骤是FFPE FISH程序相似。

变性：变性的探针和双链DNA

平均时间：5分钟

标准温度：75℃

杂交：探针杂交到靶核酸

时间范围：16 - 72小时

标准温度：37℃

已经孵育好的幻灯片必须储存在4 - 8°C,直到他们在显微镜下进行拍摄。他们可以在这些温度储存数月之久。