反相C18 Flash色谱柱使用注意事项

进口实验室仪器过柱机 25-06-22 15:37:51

之前我们讨论了很多关于反相色谱分离的各类实际操作案例和使用方案,但我们仍然收到很多的关于反相色谱柱使用问题的咨询,很多人对于什么是反相以及拥有了反相Flash色谱柱之后的使用和保存,仍然存在着很多疑问,今天我们为您列举了C18色谱柱在使用过程中的一些注意事项,希望对您的实验有所帮助。

图片
由于C18色谱柱是通过C碳链进行修饰而来,因此几乎不会对样品有强烈保留,从而保证了其具有可重复使用的特性,为了保证其具有较长的寿命,反相Flash色谱柱的使用规则往往和常规的正相有所区别。

图片
经典的反相硅胶表面的图示。C-18的烷基链键合在硅胶表面,增加了硅胶的疏水性。

使用前,色谱柱使用前需要使用100%有机溶剂(推荐乙腈)进行活化,低流速慢慢冲洗,这样可以使得C18链可以在整个有机溶剂体系中得到足够的伸展,使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使色谱柱的性能达到好状态。

反相C18在使用之后,需要保存在100%有机溶剂当中(推荐乙腈),切记不可吹干后保存,压干后容易使得C18键断裂,影响柱效和后期分离效果。

Flash C18色谱柱往往不可完全置于100% 水相当中,这样会使得C18链蜷缩,进而影响柱效。因此在起始比例设置方面,一般我们推荐从5% 或者10% 的有机相比例作为起始比例,请避免使用100%的纯水作为起始比例。因为在开始分离前,色谱柱保存在有机相当中,我们需要将100%有机相慢慢回调至起始比例,平衡一段时间后,才可开始正式分离。

一般反相 Flash C18色谱柱所支持的pH范围为:3-12之间,任何大于或者低于此数值的流动相体系都不有利于色谱柱寿命。

常规的两种反相C18流动相体系为:水-甲醇;水-乙腈。

在使用过程中的任何时候以及后期的保存,请不要将色谱柱干掉,一定要让其沉浸在溶剂之中。

流动相极性在进行转换时,跨度不宜过大,以免过度不匀,同时放热产生气泡影响分离、

在色谱柱使用完成后,需使用纯有机溶剂(乙腈或者甲醇)对对色谱柱进行冲洗,保证没有样品残留,如样品为离子型,则需要用10CV以上的溶剂冲洗,确保无残留。

若色谱柱处于长期闲置状态时,要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗10CV以上,保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液(如90%甲醇水,或者100%乙腈)中;

色谱柱在长时间使用中,压力会随着各种各样的样品的使用而形成缓慢上升的状况,如压力增大明显,可适时用大量甲醇或者乙腈进行冲洗,可使色谱柱恢复部分活性,提升一些柱效。/文:Biotage

仪器推荐
  1. 法国SinapTec Lab120 Axial实验室超声波破碎仪

    法国SinapTec Lab120 Axial实验室超声波破碎仪

    SinapTec Lab120 Axial超声波破碎仪产品独特优势及亮点: 1、处理器功率 这种创新设备提供的技术,使得处理器每一毫秒都能确保在zui佳条件下掌握和实现能量转移到媒介,任何实验条件的变化,都能精准和灵敏地反应……

    SinapTec 2025-06-23

  2. Sherwood M410C/M410火焰光度计

    Sherwood M410C/M410火焰光度计

    M410产品概览 Sherwood M410火焰光度计的所有三种型号都带有一个预装的滤棒,可容纳三元过滤器。过滤棒在烟囱外壳内很容易移除和更换(无需工具),因此引入替代元件特定过滤器是一个相对简单的操作。可用于所有 410……

    SHERWOOD,代理品牌,进口仪器,进口火焰光度计 2025-06-15

  3. 染色质免疫沉淀(ChIP)技术的难点

    染色质免疫沉淀(ChIP)技术的难点

    染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,简称ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体的特异性反应,可以真实地反映体内蛋白分子与基因组DNA结合的状况。下面我们就基本的实验……

    仪器应用 2025-05-28

  4. Biotage Selekt快速制备液相色谱

    Biotage Selekt快速制备液相色谱

    Biotage全新一代快速纯化色谱系统Selekt,使用Biotage全新研发的操作系统,并拥有专门中文操作软件,15寸超大交互界面,保证所有功能集成于一面,操作简单,易于上手,同时系统会记住用户的使用习惯,让您发现它的……

    Biotage,过柱机 2025-06-02

  5. Biospec Mini-Beadbeater-24珠磨器

    Biospec Mini-Beadbeater-24珠磨器

    Biospec Mini-Beadbeater-24 可破碎多达 24 个微生物或组织样本,效率高于 95%。细胞在密封系统中被快速安全地破坏。该设备易于清洁、占地面积小且基本上无需维护。与 Minibeadbeater-16 相比,Mini-24 添加了的电……

    BIOSPEC,代理品牌,进口仪器 2025-06-22

  6. MINITECH CNC Mini-Mill/3 纳米级微铣削加工系统

    MINITECH CNC Mini-Mill/3 纳米级微铣削加工系统

      MINITECH CNC Mini-Mill/3 CNC Mini-Mill/3市场上实惠的航空级铝框架、微铣削加工系统。 Minitech Mini Mill/3使用THK笼式滚珠线性轴承和高精度滚珠螺杆用于所有阶段。这与大型CNC具有的高质量组件相同。 M……

    MINITECH 2025-06-23

今日仪器
  1. 上海书俊联系方式

    上海书俊联系方式

    上海书俊仪器设备有限公司是注册于上海的实验室设备贸易公司。Prime Scientific 经过了近十二年的不懈努力,建立了以纽约为基地辐射全中国的营销网络,实现了在线的ERP管理。公司主要从事制药设备,生化仪器,分析……

    公司介绍 2025-06-25

  2. Biotage Initiator+ Alstra 全自动微波多肽合成仪

    Biotage Initiator+ Alstra 全自动微波多肽合成仪

    Initiator+ Alstra 全自动微波多肽合成仪 ·微波反应,温度控制,数分钟内完成一次氨基酸耦合 ·不管是侧链加成还是成环反应,Alstra都可以轻松应对 ·高精度的注射泵保证了移液的准确性! 《其他特点) ·可达2.ommol……

    Biotage,进口微波合成仪 2025-06-25

  3. WARING 8010S/8010G/8010ES/8010EG 1L双速定时组织捣碎机

    WARING 8010S/8010G/8010ES/8010EG 1L双速定时组织捣碎机

    Waring 8010S/8010G/8010ES/8010EG 容量:1L/1.2L 开关设置:双速.机械定时器.60秒 底座:环氧树脂涂层 容器:带把手的不锈钢和两层聚乙烯和 聚苯乙烯盖子-8010S 带把手的耐热玻璃和两层聚乙烯和聚苯 乙烯盖子-801……

    WARING搅拌器,代理品牌,进口仪器 2025-06-25

返回顶部小火箭